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伏殺李世民。李世民得知此事後，命長孫無忌將房玄齡、杜如晦秘密召回，一同謀劃，決定發動兵變。
同年六月，秦王李世民率領長孫無忌、尉遲敬德、房玄齡、杜如晦、宇文士及、高士廉、侯君集、程知節、秦叔寶、段志玄、屈突通、張士貴等人入朝，並在玄武門埋下伏兵。張婕妤探知了李世民的謀劃，暗中告知李建成。李建成與李元吉私下謀劃策略，李元吉建議李建成稱病不朝，李建成則認為京城防備嚴密，沒有在乎。此時，李淵已經將裴寂、蕭瑀、陳叔達、封德彝、裴矩等人召集前來，準備查驗李建成、李元吉淫亂後宮這件事情。
李建成、李元吉來到臨湖殿，察覺到了變化，立即掉轉馬頭，準備向東返回東宮和齊王府。
李世民跟在後面呼喚他們，李元吉心虛，先張弓搭箭射向李世民，但由於心急，一連兩三次都沒有將弓拉滿，箭沒有射中。李世民搭弓射箭，射殺了李建成。而尉遲恭帶領著七十餘名騎兵相繼趕到，他身邊的將士用箭射中了李元吉，李元吉跌下馬來。可就在此時，李世民的坐騎受到了驚嚇，帶著李世民奔入玄武門旁邊的樹林，李世民又被林中的樹枝掛住，從馬上摔下，倒在地上，一時爬不起來。李元吉迅速趕到，奪過弓來，準備勒死李世民，就在這時尉遲恭躍馬奔來大聲喝住了他。李元吉趕緊放開李世民，想快步跑入武德殿尋求李淵庇護，但尉遲恭迅速追上，射殺了李元吉。《舊唐書·太宗本紀》記載：“六月四日，太宗率長孫無忌、尉遲敬 德、房玄齡、杜如晦、宇文士及、高士廉、侯君集、程知節、秦叔寶、段志玄、屈 突通、張士貴等於玄武門誅之。”
這次政變，便是歷史上著名的玄武門之變。玄武門之變成為了唐朝歷史的一個重要轉折點，而長孫無忌在其中所發揮的關鍵作用，也使他成為了李世民最為倚重和信任的人物之一，從此開啟了他在唐朝政治舞臺上的輝煌篇章。
玄武門之變後，李淵立秦王李世民為太子。不久，李淵下詔傳位於太子李世民，李世民在東宮顯德殿即位，改元貞觀，史稱“唐太宗”。李世民冊封妻子長孫氏為皇后，封長孫無忌為左武侯大將軍。
公元627年，唐貞觀元年。燕王羅藝在幽州叛亂。李世民得知後，命長孫無忌率軍討伐。結果，平叛大軍還未到，羅藝就被部下所殺。一場造反鬧劇就這樣草草收場，羅藝的首級也被送到京師，在市集懸首示眾。
同年，長孫無忌改任吏部尚書，並被定為功臣第一，進封齊國公，食實封一千三百戶。長孫無忌深得李世民寵信，甚至時常可以進出李世民的臥室，可見李世民對他的信任之深。李世民幾次要任命長孫無忌為宰相，但都被他懇切地辭讓。一方面，長孫無忌深知自己作為外戚，位高權重容易引起他人的猜忌；另一方面，他也不想因自己的權勢過大而影響到朝廷的穩定。再加上長孫皇后的一再勸說，李世民便免去了長孫無忌右僕射的職務，授予他開府儀同三司之職。
長孫無忌在貞觀年間的貢獻不僅體現在政治地位上，更體現在國家治理的具體事務中。李世民登基之後，開始制定法律。長孫無忌帶領眾人對高祖武德年間倉促制定的《武德律》進行系統修改，他在立法過程中，參考了上古時期的法律體系，確立了“禮法治國”的原則，經過十餘年的努力，終於完成了“定令一千五百九十條，為三十卷”的《貞觀律》，奠定了唐朝法制的基礎。
後來長孫無忌更是在《貞觀律》的基礎之上，修訂完成了《唐律疏議》。這部法典是長孫無忌與眾多法律專家、學者共同智慧的結晶，它總結了以往歷代王朝法律制度的精華，結合唐朝當時的社會實際情況，對各種法律關係進行了系統而詳細的規定。《唐律疏議》涵蓋了刑法、民法、訴訟法等諸多方面，其條文嚴謹、邏輯嚴密，具有極高的科學性和實用性。其創造性的於律條之後附上註疏，使得“疏在律後，律以疏存”，是中國法制史上的立法典範。它貫徹“先存百姓”的指導思想及“安人寧國”的治國方針，使立法寬平，順乎歷史潮流，因而促進了唐初封建經濟迅速恢復與發展，規範了各級官員的行政行為和百姓的日常生活，對後世中國法律制度的發展產生了極為深遠的影響，成為中國古代法律文化的瑰寶，被後世歷代王朝奉為立法的典範。
在人才選拔與任用方面，長孫無忌也有著獨特的見解和積極的貢獻。他秉持著任人唯賢的理念，主張不拘一格地選拔人才，反對任人唯親的腐朽作風。他深知，人才是國家繁榮昌盛的關鍵因素，只有廣納賢才，才能使國家充滿活力與創造力。因此，他積極向李世民推薦
